基本原理:吸收光酶標儀的工作原理是基于物質(zhì)對特定波長光的吸收特性進行定量分析。當特定波長的光通過樣品時,樣品中的分子會吸收部分光能量,剩余的光能量通過檢測器被測量。通過比較樣品對光的吸收程度,可以推算出樣品中目標物質(zhì)的濃度。
朗伯-比爾定律:吸收光酶標儀的檢測基于朗伯-比爾定律(Lambert-Beer Law),該定律表明,在一定條件下,樣品對光的吸收強度與樣品濃度成正比關(guān)系。
光源與濾光片:酶標儀的光源通常為氙燈或鹵素燈,發(fā)出的光經(jīng)過濾光片或單色器后變成單色光,再照射到樣品上。濾光片的選擇非常重要,因為不同波長的光對應(yīng)不同的檢測需求。
檢測器:光線經(jīng)過樣品后,部分被吸收,部分透過。透過的光線被檢測器(如光電倍增管或光電二極管)捕捉并轉(zhuǎn)換為電信號。這些信號經(jīng)過放大和處理后,轉(zhuǎn)化為吸光度值。
數(shù)據(jù)處理:酶標儀通過計算吸光度值(OD值)來確定樣品中目標物質(zhì)的濃度。OD值是吸光度與透光度的差值,通常用于定量分析。
應(yīng)用范圍:吸收光酶標儀廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究、藥物研發(fā)、臨床實驗以及食品安全檢測等領(lǐng)域。它主要用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、蛋白質(zhì)濃度測定、細胞增殖和毒性檢測等。
技術(shù)特點:精度:現(xiàn)代酶標儀具有高精度的光學(xué)檢測能力,能夠進行多種類型的酶促反應(yīng)分析。多功能性:除了吸收光檢測外,一些高級酶標儀還支持熒光檢測、化學(xué)發(fā)光檢測等多種功能。自動化:許多酶標儀集成了自動進樣、清洗和數(shù)據(jù)處理功能,減少了人工操作步驟。